CFDA SE Cell Proliferation and Cell Tracking Kit 細(xì)胞增殖與示蹤檢測(cè)試劑盒
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 價(jià)格(元) |
FS1158-25MG | CFDA, SE (CFSE) 細(xì)胞增殖示蹤熒光探針 | 25mg | 1500.00 |
FS1159-500T | CFDA SE Cell Proliferation and Cell Tracking Kit 細(xì)胞增殖與示蹤檢測(cè)試劑盒 | 500T | 720.00 |
細(xì)胞增殖與示蹤檢測(cè)試劑盒 熒光探針 細(xì)胞增殖與示蹤檢測(cè)試劑盒 熒光探針
產(chǎn)品描述
CFDA SE(CFDA SE Cell Proliferation and Cell Tracking Kit)是一款基于熒光探針CFDA, SE,用于細(xì)胞增殖檢測(cè)和細(xì)胞熒光示蹤的檢測(cè)試劑盒。此方法目前廣泛替代MTT法或者3H-胸腺嘧啶核苷摻入法(3H-thymidine incorporation)等細(xì)胞增殖檢測(cè)方法。本試劑盒包含粉末形式的CFDA, SE探針,細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)的溶劑,以及細(xì)胞標(biāo)記液,使用方便,操作簡(jiǎn)單。按照每個(gè)樣本的標(biāo)記體積為1ml來(lái)算。500T 的可以檢測(cè)500個(gè)樣品
CFDA, SE,英文全名5(6)-Carboxyfluorescein diacetate N-succinimidyl ester,CAS NO. 150347-59-4,是一種穩(wěn)定的、細(xì)胞膜滲透性的非熒光染料,由兩個(gè)醋酸基團(tuán)和一個(gè)琥珀酰亞胺酯(SE)官能團(tuán)組成的一個(gè)熒光分子。一旦主動(dòng)擴(kuò)散進(jìn)入細(xì)胞,其醋酸基團(tuán)被胞內(nèi)酯酶切割,生成熒光素酯CFSE。CFSE具有高度熒光,且能通過(guò)其琥珀酰亞胺酯基團(tuán)共價(jià)結(jié)合到細(xì)胞內(nèi)的蛋白氨基基團(tuán)。正是這個(gè)共價(jià)偶聯(lián)反應(yīng),CFSE能夠極其長(zhǎng)期的保留在細(xì)胞內(nèi),長(zhǎng)達(dá)數(shù)個(gè)月。另外,歸因于這一穩(wěn)定連接,一旦染料進(jìn)入細(xì)胞,不會(huì)轉(zhuǎn)移到鄰近細(xì)胞。無(wú)活力細(xì)胞仍然是非熒光。而活細(xì)胞一旦分化,CFSE能夠很均勻的分散到子細(xì)胞中,每分裂一次子代細(xì)胞約能得到親本細(xì)胞1/2的熒光強(qiáng)度,因此,通過(guò)流式細(xì)胞儀對(duì)熒光強(qiáng)度的檢測(cè),能夠依次分選出未分裂細(xì)胞,分裂一次的細(xì)胞(1/2熒光強(qiáng)度),分裂兩次的細(xì)胞(1/4熒光強(qiáng)度),分裂三次的細(xì)胞(1/8熒光強(qiáng)度),以及以此類推其他分裂次數(shù)的細(xì)胞。CFSE可以檢測(cè)分裂多達(dá)8次或更多次數(shù)的細(xì)胞增殖。
CFSE廣泛用于細(xì)胞zen殖和體內(nèi)細(xì)胞示蹤研究。CFSE的zui大激發(fā)和發(fā)射波長(zhǎng)分別為492nm和517nm,標(biāo)記細(xì)胞后呈綠色熒光。使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)可用FL1檢測(cè)通道。也能用熒光顯微鏡觀察,使用FITC濾片。
產(chǎn)品包裝
編號(hào) | 組分 | 保存方法 | 產(chǎn)品編號(hào)/規(guī)格 | |
FS1159-500T | FS1159-1000T | |||
FS1159-A | CFDA SE粉末 | -20ºC避光保存 | 1管 | 1管×2 |
FS1159-B | CFDA SE溶劑 | -20ºC避光保存 | 1ml | 1ml×2 |
FS1159-C | 細(xì)胞標(biāo)記液(10X) | -20ºC~4℃保存 | 50ml×2 | 50ml×4 |
注意事項(xiàng)
1)CFDA SE溶劑在低溫(如4℃,冰浴)等條件下會(huì)凝固而粘在離心管底、管壁或蓋子上,可將其置于25℃溫育片刻直至全部融解后使用。
2)CFDA SE粉末經(jīng)溶劑溶劑配制成儲(chǔ)存液后一個(gè)月內(nèi)用完,zui多不超過(guò)三個(gè)月。因CFDA SE容易被水解,并在水溶液中變質(zhì)。使用過(guò)程中盡量避免接觸水。而在標(biāo)記過(guò)程中接觸到水是在允許范圍內(nèi)。
3)熒光染料均存在淬滅問(wèn)題,操作和儲(chǔ)存過(guò)程中需注意避光,以減緩熒光淬滅。
4)為了您的an全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
使用方法
1. CFDA SE儲(chǔ)存液(1000X)制備
2. CFDA SE標(biāo)記液(1X)制備
3. 染色步驟
常見(jiàn)應(yīng)用和數(shù)據(jù)示例:
根據(jù)熒光信號(hào)的稀釋來(lái)檢測(cè)細(xì)胞zen殖和分化(示蹤)(Cell proliferation and cell division by Dye Dilution Method),此方法主要用來(lái)體內(nèi)外檢測(cè)淋ba細(xì)胞(T細(xì)胞和B細(xì)胞)的增殖,也能用來(lái)檢測(cè)NK細(xì)胞,成纖維細(xì)胞甚至細(xì)菌。也有用來(lái)研究可移植造血干細(xì)胞的增殖。
示例1(體外).
Fig 1. Murine CD4+ lymphocytes, labelled with CDFA-SE were cultured with antigen-presenting cells with different peptides to stimulate either the memory or the memory and naïve cells. Up to five cell divisions can be observed.